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1996年,首次出演电视剧,是在军旅题材剧《红十字方队》中饰演出身高干家庭,性格耿直的江男。1997年,与李湘、何炅主演都市情感剧《北京假日》饰演倪小晨。同年参演何群执导,赵雅芝主演,审视中国工业民族化、现代化进程的史诗剧《百年沉浮》。1998年,参演滕华弢导演的电视剧《找不着北》。同年搭档尤勇共同主演刑侦剧《好汉的梦》饰女主角周菱。之后在王琳、赵有亮主演的《难舍真情》中饰演大女儿汤华。1999年,与侯勇共同主演电视剧《江湖笑面人》饰上海女伶金玲芳。2001年,在易晓钟导演的纪实风格警匪剧《黑白大搏斗》中饰演罪犯杨海涛的女友林雅云。同年领衔主演古装剧《衙门口》,并分饰金姑、玉姑两个角色。2002年,搭档周浩东主演电影《断钻》。同年在陈数、马跃主演的电视剧《铿锵玫瑰》中饰演刑警大队的内勤霍秋莲。之后与钟镇涛、罗家英主演的电视剧《迟来的祝福》。2003年,在年代抗战剧《似血残阳》中饰演玉雯。之后在李进荣、陈德容主演的古装剧《步步高升》中饰演九姑娘。同年参演古装轻喜剧《笑八仙之素女的故事》。同年还搭档梅婷、蒋竹青主演《谁可相依》饰卢琳。2004年,与范智博领衔主演的以“监狱”为题材的20集电视连续剧《女子监狱》播出。同年在讲述邓小平赴法国勤工俭学期间发生的一系列曲折跌宕故事的电影《我的法兰西岁月》中饰演在巴黎公社社员墙前和邓希贤一起加入中国少年共产党的蔡畅。2006年,参演现代军事题材剧《和平使命》。同年在林汝为执导的《采桑子》中饰演三格格金舜钰,后来成为共产党的地下员。2007年9月28日,领衔主演由毕淑敏现实主义小说改编的电视剧《女工》正式开机,在剧中饰演女主人公浦小提。11月9日领衔主演的电影《天山雪》上映,影片参加第十七届金鸡百花电影节新片展。2009年,在任程伟、许晴主演的电视剧《同龄人》中饰演宣传队的女同学林红。2010年,出演李慧珠执导的两部古装剧《美人天下》和《国色天香》,分别饰演王美人和方媚娘两个角色。2011年,与王奎荣主演的抗战剧《虎头要塞电流》获得第11届百合奖二等奖。同年出演简川訸执导的谍战剧《蝴蝶行动》。之后再张新建执导的讲述知青在黑龙江兵团和地方插队生活状态的电视剧《知青》中饰演女知青排长方婉之。2012年,与王洛勇联袂主演电影《生死罗布泊》饰地质勘探队工程师冷嵋,该片讲述了70年代末,一支由八人组成的地质科考队进入罗布泊,为国家寻找钾盐的故事,影片入围第二十届北京大学生电影节。同年,还在郭凯敏首次担纲执导的的抗战史诗电视剧《先锋1931》里饰演剧中的女一号苏皖。并在同年出演陈贵执导的《当家的男人》。2013年,再次与导演陈贵合作,主演的反映“中国优质稻米之乡”—黑龙江省五常市新农村建设的电影《雪落牤牛河》在中国电影资料馆举行首映礼。8月参加的抗日剧《穿越烽火线》在央视一套播出。2014年,杨圣文出演了电视剧《西部警魂》(又名《神警郝万忠》),该片以真实故事改编,王文盛执导。