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2005年12月25日,随着上海东亚足球俱乐部的成立,他获得了更多崭露头角的机会,年仅16岁的王佳玉开始征战中国足球乙级联赛。凭借着刻苦的训练和出色的表现,他牢牢地占据着上海东亚队右前卫的位置,并且徐根宝也放心的把队长袖标交给他。随着2007年上海东亚冲入中甲,表现出色的王佳玉越来越受到各级别国家队教练的青睐,先后多次入选国青队,并担任队长。2008年,中国足球甲级联赛中,打进6球,队内射手王;2009年,中国足球甲级联赛中,打进4球,并且代表上海全运队参加了在山东举行的第十一届全运会U20男足比赛,获得冠军;2010年,入选布拉泽维奇率领的国奥队赴埃及拉练;2010年12月,与队友姜志鹏一同转会至南昌衡源队,转会费共计600万元;2011年1月,他受到布拉泽维奇的赏识,入选“布一期”,成为国奥队的一员。2011年4月1日,在南昌衡源主场迎战杭州诺贝尔绿城的比赛中,首发登场,完成中超首秀。
2013年12月,上港队用三名年轻球员换回此前的队长王佳玉。2015年6月22日,上港集团足球俱乐部与杭州绿城足球俱乐部就球员王佳玉租借一事达成一致。王佳玉正式加盟杭州绿城足球俱乐部至赛季结束。2017年,为了能有更好的状态,更好的职业生涯,有重回巅峰的可能性,王佳玉去西班牙助力洛尔卡俱乐部冲击西乙A,帮助徐根宝做些具体的工作。