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1966年，陈志坚出生于福建省安溪县长坑乡南斗村，小时候，他的父亲在南平工作，母亲在南斗小学当民办教师。陈志坚是家中老大，他一边读书，还一边帮助母亲照顾两个弟弟。1979年，13岁的陈志坚进入福建省安溪县第一中学。1981年，从福建省安溪县第一中学高中毕业，考入福建师范大学。1985年，毕业于福建师范大学生物系后，考取福建师范大学余宝笙教授指导的生物化学专业硕士研究生，外语成绩居全省研究生第一名。1986年，考取了美国纽约州立大学，攻读博士。1991年，获得美国纽约州立大学生物化学博士学位，随后到美国圣地亚哥的索克研究所从事博士后研究。1997年，在美国德克萨斯大学西南医学中心工作，先后担任分子生物学系助理教授、副教授、终身教授。2005年，任美国霍华德·休斯医学研究所研究员，同年获得美国海克曼化学奖。2007年，获得美国德克萨斯医学、工程和科学院颁发的德克萨斯研究最高奖：杜奈尔奖。2012年，获得美国国家科学院授予年度分子生物学奖。2014年，当选美国国家科学院院士。
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