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一名大学生，同时也是蜘蛛侠。在蜘蛛侠这个英雄形象越来越被纽约市民接受和热爱的同时，他却陷入了和玛丽简的感情危机中。失意后，他放纵自己与外星寄生物过度接触导致做出来许多过分的事情。同样也被该外星生物寄生的彼得同事艾迪，联手沙人，一起向蜘蛛侠发起挑战。蜘蛛侠与好友哈利共同应战。
彼得的女朋友，知道蜘蛛侠的真实身份就是彼得。她经过自己的努力，如愿以偿地登上了百老汇的舞台，但是由于观众的评价不是很好，她被炒了鱿鱼。在她职场失意的时候，彼得作为蜘蛛侠的人气却蒸蒸日上，再加上其他一些琐事，导致两人的感情陷入了危机。
彼得和玛丽的好朋友。一心认为是蜘蛛侠害死了自己的父亲，想要报仇。在一次与蜘蛛侠的打斗中撞到头部后，丧失了最近一段时间的记忆，因此又同彼得和玛丽成为了亲密无间的好朋友。后来记忆恢复，再次向蜘蛛侠寻仇，但是失败。最后，他和彼得之间的误会得以化解，两人并肩作战对抗毒液与沙人。
一名机灵狡猾的摄影记者，彼得在报社的同事，穿着讲究，懂得讨女人的欢心。因制作假照片的事被彼得揭穿而被炒了鱿鱼，因此怀恨彼得。当彼得在钟楼顶摆脱外星寄生体的时候，正巧站在楼下的埃迪继承了寄生体。他联合沙人，想一同除掉彼得。
一名越狱的逃犯，在逃跑的时候不慎跌入带有严重核辐射污染的沙坑，导致他变成了沙人，可以随意改变身体的形态为沙子。为了给女儿治病，他需要搞到很多钱，因此他成了蜘蛛侠管理城市治安要惩治的目标之一。并且，他还和彼得叔叔的死亡有很大关系。后来，同毒液联手挑战蜘蛛侠。
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